3种白腐菌木质素降解酶的比较_图文

维普资讯 http://www.cqvip.com

第２ ７卷

第 ３期　

中 南 林 业 科 技 大 学 学 报　
Ｊ ｕ ｎ ｌ ｆＣｅ ｔａ　 ｏ ｔ 　 ｉｅ ｓｔ　 ｆＦｏ ｅ ｔｙ＆ Ｔｅｈ ｏｏ ｙ ｏ ｒ ａ ｏ　 ｎ ｒｌＳ ｕ ｈ Ｕｎｖ ｒ ｉ ｏ　 ｒ ｓｒ 　 ｙ ｃ ｎ ｌｇ 　

Ｖ ｏ ．２ 　 Ｎ ｏ 　 １ ７ ．３

２ ０ 年 ６月　 ０７

Ｊｎ ０７ ｕ ．２ ０ 　

文 章 编 号 ：１ ７ ～ ９ ３ ２ ０ ） ３ １ １ ０ 　 ６ ３ ２ Ｘ（ ０ ７ ０ —０ ３ ～ ５

３种 白腐菌木质 素降解酶的比较　
董旭 杰 ， 曹福 祥 ， 陈 静， 吕 聪　
（ 南 林业 科 技 大 学 ， 南 长 沙 ４ ０ ０ ） 中 湖 １ ０ ４　

摘　 要 ： 对 ３ 白腐 菌—— 黄孢 原毛平革菌 、 　 种 变色栓 菌和 木质层孔菌在恒温振 荡培养 条件下 产漆酶、 锰过氧化物酶的情况进行 比 　
较 研 究 ， 时 还 对此 ３种 菌 在 培养 过 程 中还 原 糖 的变 化 作 了研 究 ． 果 表 明 ： 白腐 菌 中变 色 栓 菌 产 漆 酶 相 对 最 高 ， 漆 酶酶 活 最 高　 同 结 ３种 其 达 到 １ ６ ５Ｕ／ 产 酶 最 高 时 间 为 第 ８天 ； ３ ．　 Ｌ， 丽木 质 层孔 菌 产锰 过 氧 化 物 酶 相 对 最 高 ， 最 高 酶 活 达 到 ８０ ２Ｕ／ 产 酶 最 高 时 间 为 第 ８ 其 ８ ．　 Ｌ， 　 天 ； 时在 培 养 过 程 中还 原 糖 含 量 随 培 养 时 间的 延 长 而 逐 渐 降 低 ． 同 　

关 键 词 ： 酶工程 ｝ 　 木质素降解酶 ； 酶学性质 ； 白腐菌　

中 图 分 类 号 ： ０ ３ ， ｝ ５　 ６６２Ｑ ５

文 献 标 志 码 ： Ａ　 　

Ｃｏ ｐ ｒ ｓ ｎ ｏ 　 ｇ ｎ Ｄｅ ｒ ｄａ ｉ ｎ Ｅｎｚ ｍ ｅ 　 ｏ ｕｃ ｄ Ｂｙ ｍ ａ ｉ ｏ 　 ｆ Ｌｉ ｎｉ 　 ｇ ａ ｔ ｏ 　 ｙ ｓ Ｐｒ ｄ ｅ 　 　
Ｔｈ ｅ 　 ｈｉｅ ｒ ｔＦｕ ｉ ｒ ｅＷ ｔ － ｏ 　 ｎｇ 　

ＤＯＮＧ Ｘｕ ｊ ，ＣＡＯ　 — ｉｎ 　 —ｉ ｅ Ｆｕ ｘａ ｇ，ＣＨＥＮ　 ｉｇ，Ｌｎ Ｃ ｎ 　 Ｊｎ 　ｏ ｇ
（ ｎｔａ　 ｏ ｔ 　 ｉｅ ｓｔ　 ｆＦ ｒ ｓｒ 　ｎ 　 ｃ ｎ ｌｇ Ｃｅ ｒ ｌＳ ｕ ｈ Ｕｎ ｖ ｒ ｉ ｏ　 ｏ ｅ ｔｙ ａ ｄ Ｔｅ ｈ ｏ ｏ ｙ，Ｃｈ ｎ ｈ 　 １ ０ ４，Ｈｕ ａ ｙ ａ ｇｓ ａ ４ ０ ０ ｎ ｎ，Ｃｈｎ 　 ｉａ）

Ａ ｂ ｔ ａｃ ： ｃ ｍｐ ｒ ｔｖ 　 ｔ ｄ 　 ｓ ｍａ ｅ ｏｆｔ ｅ ｐｒ ｄ ｃ ｉ ｎ ｏ 　 ｃ ａ ｅ ａ ｄ Ｍ ａ ｇ ｎｅ ｅ ｐ ｒ ｘｉ ａ ｅ 　 ｎ ｖ ｂ ａ ｉ ｇ ｃ ｌｉ ａ ｉ ｎ ｂ 　 ｈｒ ｅ ｓ ｒ ｔ Ａ　 ｏ ａ ａ ｉ ｅ ｓ ｕ ｙ ｗａ 　 ｄ 　 　 ｈ 　 ｏ ｕ ｔｏ 　 ｆ Ｌａ ｃ ｓ 　 ｎ 　 ‘ ｎ ａ ｓ 　 ｅ ｏ ｄ ｓ ｓ ｉ 　 ｉ ｒ ｔ 　 ｕ ｔｖ ｔ 　 ｙ ｔ ｅ 　 ｎ ｏ ｗｈ ｔ — ｏ 　 ｕ ｇｉ ｉｅ ｒ ｔ ｆ ｎ ：Ｐｈ ｎ ｒ ｃ ａ ｔ　 ｈ ｙ ｏ ｐ ｒ ｕ ，Ｔｒ ｍｅｅ 　 ｅ ｓｃ ｌ ｒａ ｄ Ｆａ ｓ ｉ ｏ ｕ ，ａ ｄ ｏ 　 ｈ 　 ｏ ｃ ｎ ｒ ｔｏ 　 ｈ ｎ ｅ ｏ 　ｈｅ ｒ ｄ ｃ ｄ ａ ｅ ｏ ｈ ｅｅ ｃ ｒ ｓ ｓ ｏ ｉ ｍ ａ ｔ ｓｖ ｒ ｉｏ ｏ 　 ｎ 　 ｍｅ 　 ｇｎ ｓ ｓ ｎ 　 ｆｔ ｅ ｃ ｎ ｅ ｔ ａ ｉ ｎ ｃ ａ ｇ 　 ｆｔ 　ｅ ｕ ｅ 　 ｌ
ｇ ｕ ｏ ｅ ｉ 　 ｉｆ ｒ ｎ 　 ｕ ｔｖ ｔｏ ｌ ｃ ｓ 　ｎ ｄ ｆ ｅ ｅ ｔｃ ｌｉ ａ ｉ ｎ．Ｔｈ 　 ｅ ｕｌｓｓ ｏ ｔ ａ 　 ｈ 　ａ ｃ ｓ 　 ｒ ｄ ｃ ｄ ｂ 　 ａ ｔ ｓｖ ｒ ｉｏ ｏ 　ｓ ｔ ｅ ｈ ｇ ｅ ｔａ ｅ ｒ ｓ ｔ　 ｈ ｗ　 ｈ ｔｔ ｅ ｌ ｃ ａ ｅ ｐ ｏ ｕ ｅ 　 ｙ Ｔｒ ｍｅｅ 　 ｅ ｓ ｌ ｒ ｉ　 ｈ 　 ｉ ｈ ｓ 　 ｍｏ ｇ ｔ 　ｈｒ ｅ，ｔ ｅ ｃ ｎ 　ｈｅｔ ｅ ｈ　 ｍａ ｇ ｎ ｓ ｅ ｐ ｒ ｘ ｄ ｓ ｓ ｐ ｏｄ ｃ ｄ ｂ 　 ｍｅ　 ｉ ｏ ｕ 　ｓ ｔ 　 ｉ ｈ ｓ　 ｍ ｏ ｇ ｔ ｅ ｔ ｒ ｅ，ａ ｄ ｔ 　 ｌ ｃ ｓ 　 ｏ ｃ ｎｔａ ｉ ｎ ｗｉ　 ｅ ｌ ｗｅ ｅ 　 ｎ ａ ｅ ａ 　 ｅ ｏ ｉ ａ ｅ 　 ｒ ｕ ｅ 　 ｙ Ｆａ ｓ ｌ ｇｎ ｓ ｓ ｉ　 ｈｅ ｈ ｇ ｅ ｔ ａ ｎ　ｈ　ｈｅ ｎ 　 ｈｅ ｇ ｕ ｏ ｅ ｃ ｎ ｅ ｒ ｔｏ 　 ｌ ｂ 　 ｏ ｒ ｄ ｌ

ｗｉ 　 ｕｔｖ ｔｏ 　 ａ ． ｔ ｃ ｌｉａｉｎ ｄ ｙｓ　 ｈ Ｋｅ 　 ｙ ｗｏｒ ｓ：ｎ ｙ 　ｎｇｎ ｅｉｇ；ｌ ｉ　 ｇ ａ ａｉ ｎ；ｃ ａ ａ ｔｒｓｉｓｏ　 ｎ ｙ ｏｏ ｙ；ｗｈｔ ～ｏ　ｕ ｇ　 ｄ ｅ ｚ ｍｅｅ ｉｅ ｒｎ ｉ ｎｄｅ ｒ ｄ ｔｏ ｇｎ ｈ ｒｃ ｅｉｔ 　 ｆｅ ｚ ｍ ｌ ｇ ｃ ｉｅ ｒ ｔｆ ｎ ｉ

木质 素是 地球 上仅 次 于纤 维 素 的最 为丰 富 的有机 再 生 资源 ， 是一 类 以苯丙 烷 为 基本 结构 单元 构 成 的复　 它 杂 的芳 香族 高 分子 化合 物 ． 随着 人 类 可利用 资 源 的越 来越 紧 缺 ， 木质 素 的微 生物 降解 成 了当今 研究 的热 点 ． 据　 报 道， 自腐 菌 ｗｈｔ ｒｔ ｕ ｇ ｓ ＷＲ ｉ 　ｏ ｆ ｎ ｕ ， Ｆ是 木 质 素 降 解 能 力 很 强 的 真 菌． ｅ 　 国外 对 黄 孢 原 毛 平 革 菌 Ｐ ａ ｅｏｈ ｅ 　 ｈ ｎｒｃ ａｔ ｅ

ｃ ｒｓｓｏｉｍ 的木 质素 降解 已作 过一 定 的研究 Ｌ ， ｈｙ ｏｐ ｒ ｕ １ 已从 该 菌 中首次 分离 纯化得 到 ２种 降解 木质 素 的酶系 ——　 　
木 质 素过 氧化 物 酶Ｌ ｇ ｉ　 ｅｏ ｉａ ｅ （ ｉｎｎｐ ｒ ｘｄ ｓ ｓ 简称 Ｌ ｐ ， 过 氧化 物 酶 Ｍａ ｇ ｎ ｓ　 ｅｏ ｉａ ｅ （ 称 Ｍｎ ） 国内李 慧　 ｉ） 锰 ｎ ａ ｅｅｐ ｒｘｄ ｓｓ 简 Ｐ； 蓉 等０对 该 菌研究 也 较多 ． 色栓 菌Ｔｒ ｍｅ ｓ ｅｓ ｏｏ 　 变 ａ ｔ 　 ｒｉ ｌ ｅ ｖ ｃ ｒ的木质 素 降解 已有报 道　 ］从 中提 出漆酶 Ｌ ｃａｅ 简　 ， ａｃｓ （ 称 Ｌ ｃ 含量相对 较 高． ａ） 但至今 国内外 尚未 见到 木质 层孔 菌 Ｆｏ ｓｌ ｎ ｓｓ 质素 降解 方 面的相 关 报道 ， 没有　 ｍｅ　 ｇ ｏｕ 木 ｉ 也 这 ３种真 菌木 质素 降解 的 比较研 究． 文 中 旨在研 究 相 同条件 下 这 ３种 白腐 菌木 质素 的降解 能力 ， 时为进 一　 本 同 步优 化产 酶条 件 的研究 打下 基础 ． 　

收 稿 日期 ：２ ０— ２０　 ０ ６１— ４

修 回 日期 ：２０ — ３３ ０ ７ —１ ０ 　

作者 简 介 ：董旭杰 （９ ０ ）女 ， １ ８ － ， 辽宁葫芦岛人． 硕士研究生 ， 主要从事蛋 白质与酶工程研究　

维普资讯 http://www.cqvip.com

ｌ２ ３　

中

南

林

业

科

技

大

学

学

报　

第２ ７卷　

１ 材 料 和方 法　
１１ 菌 ． 种　

黄孢原 毛平 革菌 Ｐ ｃ ｒｓｓ ｏｉｍ ５ ０ ７ ， 自中科 院微 生物 研究 所 ； 色栓 菌 Ｔ． ｅｓ ｏｏ　． １ １ 购 自 ． ｈｙ ｏｐ ｒｕ 　 ． ７ ６ 购 变 ｖｒｉ ｌ ５ ０ ６ ， 　 ｃ ｒ 中科 院微生 物研究 所 ； 木质层 孔 菌 Ｆ．ｉｎ ｓｓ５ ０ ３ ， 自中科 院微 生物 研究 所． １ ｏｕ　 ． １ ２ 购 ｇ 　
１ ２ 主 要 试 剂 及 仪 器　 ．

ＡＢ ＴＳ（ ，　 Ａｚ ｏｂｓ （一ｔｙ　 ｅ ｚｂｏ ｏｉｅ６ｓ ｌ ｎｃａｉ ）Ｓｇ ２ ２ 一 ｉ — ｉ ３ｅｈ ｌ ｎ ｔｉｚ ｌ 　 －ｕｆ ｉ ｃｄ） ｉｍａ公 司． Ｑ— ２ ０全温 振 荡 培养　 ｎ 一 ｂ ｎ ｏ 　 ＨＺ Ｆ ８

箱（ 太仓华 美 生化 仪器 厂 ）ＵＶ一 １ ２Ｐ ， ２ ０ 　 Ｃ紫外 可 见分光 光 度计 （ 尤尼 柯 仪器 有 限公 司） Ｄ Ｌ 　 ０　 Ｈ计 （ ， Ｅ ＴＡ ３ ２ｐ 梅　
特勒 一托利 多仪器 有 限公 司） ． 　
１ ３ 培 养基　 ．

培 养基 Ａ 高碳 低氮 （ Ｌ （ ／ ＝３ ３ ： ＨＣ Ｎ）Ｃ Ｎ ０ ） 葡萄糖 ２　 ， 石酸铵 ０ ２ｇ 磷 酸二 氢钾２ｇ 硫酸镁 １ ５ｇ 维生　 ０ｇ 酒 ．　 ， 　， ．　 ， 素 １ ￣２　 ， 量元 素 １ ０ｍＬ　 ０ ０ｍｇ 微 ５　 ． 培 养基 Ｂ低 碳高 氮 （ Ｃ Ｌ ＨＮ） Ｃ Ｎ＝３ ０ ） 葡萄糖 ２ｇ 酒 石酸铵 ２ｇ 磷酸 二氢 钾 ２ｇ 硫酸 镁 １ ５ｇ 维 生素　 （／ ．３ ： 　， 　， 　， ．　 ， Ｂ　０ ０ｍｇ 微 量元 素 １ ０ｍＬ　 １ ￣２ 　 ， １ ５　 ． 培 养基Ｃ高碳 高氮 （ ＨＮ）Ｃ／ ＝３ ． ） 葡 萄糖２ 　 ， 石酸铵 ２ｇ 磷酸 二氢 钾２ ， 酸镁 １ ５ｇ 维 生素　 ＨＣ （ Ｎ ０３ ： ０ 酒 ｇ 　， 　 硫 ｇ ．　 ， Ｂ　０ ０ｍｇ 微 量元素 １ ０ｍＬ　 １ ￣２ 　 ， １ ５　 ． 微量元 素混 合 液 ： Ｓ 　．　 Ｍｎ Ｏ４ ９ｍｍｏ／ Ｃ Ｃ ２ ． 　 ２ ｌＬ， ａ １０ ９ｍｍｏ／ Ｎａ １ ． ７ｍｍｏ／ 　 ｌＬ， Ｃ　 １　 ０ ｌＬ，Ｚ Ｃ ２ ． ４ 　 ｎ １０ ３ ８ｍｍｏ／　 　 ｌＩ　 ，
Ｆｅ Ｏ４ ． ５ 　 Ｓ 　 ３ ９ｍｍｏ ／ Ｃｕ Ｏ４ ． 　 ０ ｌＬ， Ｓ ０ ４ ｍｍｏ ／ Ｃ Ｃ１ ｌ Ｌ， ｏ ２·６ Ｏ２ ． ７ 　 Ｈ２ ０ ７ ５ｍｍｏ ／ ＫＡｌ Ｓ ） ｌＬ， （ Ｏ４ ２·１ Ｈ２ ０ ０ １ｍｍｏ ／ 　 ２ Ｏ　 ． ２ 　 ｌＬ，
ＨＢ 　． ６ｍｍｏ／ Ｏ３ １ 　 ０ ｌＬ，Ｎａ ｏ Ｍ Ｏ４·２ Ｏ２ ． ４ 　 Ｈ２ 　 ０ １ｍｍｏ Ｌ． ０ ｌ／ 　

１ ４ 测 定 方 法　 ．　

漆 酶 的 测 定 参 照 Ｍｕ ｏ 方 法　 稍 作 修 改 ： 应 体 系 含 有 ５０ ｎｚ 反 　　 ｍｍｏ ／ ｌ Ｌ醋 酸 一醋 酸 钠 缓 冲 液　

（ Ｈ值 ４ ５ ２ｍＬ， ．　 ｐ ． ）　 ０ ５ｍｍｏ／ 　 Ｔ ０ １ ｌＬＡＢ Ｓ ．　 ｍＬ和 适 当的酶 液 ， ５ 于２ ℃测 定反 应液 在３ｍｉ 　 ｎ内于４ ０ｎ 处 吸光 值　 ２ 　ｍ
的增 加． 义 每 分钟 氧 化 １￣ ｌ Ｔ 定 ｍｏＡＢ Ｓ所 需 的酶 量 为 １ 酶 活力 单 位 （ ＴＳ ４ ０ｎ 消光 系数 ￡ 。 ３　０ 　 个 ＡＢ 　 ２ 　 ｍ 　 一 ６０ ０
Ｍ 一 ｃ 一 ）　 　ｍ 　 ．

锰 过 氧化 物 酶 的 测定 参 照 李 慧 容 等 的方 法　 。 　 稍作 修 改 ： 反应 体 系 中含 有 ５ ｍｍｏ／ ｐ ０ ｌＬ Ｈ值４ ５ ． 的乳 酸一 　
乳酸 钠 缓 冲 液 ２ ｍＬ， ． ｍｍｏ ／ １ ６ ｌ Ｌ的 硫 酸 锰 溶 液 ０ １ ．　 ｍＬ， ． ｍｍｏ ／ Ｈ Ｏ ０ １ １ ６ ｌ Ｌ 　 　 ．　 ｍＬ和 酶 液 适 量 ． 温 下　 室

２ ０ｎ ４　 ｍ处 测 反 应 于 ４ ｎ ｍｉ 内吸 光 度 的 增 加 ． 义 每 分 钟 使 １ ｍｏＭｎ 转 化 为 Ｍｎ 定 ￣ ｌ 　 抖所 需 的 酶 量 为 １ 酶 活 力　 个 单 位． 　 还原糖 的测定 ： 葡萄糖 溶 液作标 准 曲线 ， 用 测定 酶　 液 在 ５ ０ ｎ 处 的 吸 光 值． 原 糖 标 准 曲 线 ： １　 ４　 ｍ 还 将 ０ ｍｇ ｍＬ的标准 葡萄糖 溶 液 ， Ｈ 值４ ５的柠 檬 酸缓 冲　 ／ 用ｐ ． ， 　

液稀释成一组梯度葡萄糖标准液， 其浓度分别为 ：． 、 翌 ０ ０２　 　 ４ ． 、 ． 、． 、 　 ； 将　 标 准 液 与　 ． ６
０ 　
．

０ 　０ 　１ ０ 　６ 　８ 　 　ｍｇ ｍＬ ／ 　

１ 　ｍＬ 　

３ｍＬ ＮＳ 剂 混 合 ， 水 煮 沸 约 ５ｍｉ ， 却 至 室　 《 …　 　 Ｄ 试 沸 　 ｎ后 冷 温 ， 蒸馏 水 定 容至 ２　 加 ５ｍＬ， 以去 离 子水 为对 照 ， 分 用
光 光度计 在 ５ ０ｎ 处 测其吸 光值． 测 得葡 萄糖 溶 液　 ４　ｍ 所 标 准 曲 线 如 图 １所 示 ， 用 回归 方 程 Ｙ一 ０ １ ５２ 　 利 ． ９　 ｘ
－

０　 ． ２

０． ２ 　

０４ ．　

０６ ． 　

０８ ．　

１ 　

０ １ ３２ 得 到 还 原 糖 的 浓 度 ． ． ２　 ， 　

葡 萄 糖 浓度 ／ｍ · 　 ） （ｇｍ 　

图 １ 还 原 糖 标 准 曲 线　

２ 结 果 与 讨论　
２ １ 不 同培养 条件 对 ３ 茵产 Ｌ ｃ的影 响　 ． 种 ａ

Ｆ．　 ｉ１ ｇ

Ｔｈ 　 ｓ ａ ａｒ 　 ｃ ｖｅ ｏｆ ｇｌ ｏ ｅ ｃ ｅ ｔ ｎｄ ｄ ｕｒ 　 　 ｕｃ ｓ 　 ｏｎｔｎｔ ｅ 　
ｄｅ ｅ ｍ ｉ ｔ ｏ 　 ｔｒ ｎａ ｉ ｎ

在不 同营养 的培 养条件 下 ， 种 菌种 产漆 酶 的情 况见表 １和图 １ 图 ３ ３ ～ ． 　

维普资讯 http://www.cqvip.com

第 ３期　

董 旭 杰 等 ： 种 自腐 菌 木 质 素 降 解 酶 的 比较　 ３
表 １ 不 同 营 养条 件 对 ３ 菌 产 Ｌ ｃ的 影 响　 种 ａ
Ｔａｂ ｅ １ Ｔｈｅ ｅ ｆ ｃ ｓｏｆｔ ｅ 　 ｌ　 　 　 ｆ ｅ ｔ　 　ｈｒ ｅＬａｃｉ 　 ｆ ｅ ｅ 　 ｔ ｉｉ 　ｎ ｄｉｆ ｒ ｎｔｎｕ ｒ ｔｏｎａ　 ｏｎｄ ｔｏ 　 ｌｃ ｉｉ ｎ

１３ ３　

０　
Ｊ 　

己　
＼ 　

瞧　 键　 键　 燧　

蜒　

漕　 潜　
艇　

时问／　 ｄ
＋ Ｈ ＣＬＮ ＋ ＬＣＨＮ　 十 Ｈ ＣＨＮ　
—

时间／　 ｄ
◆一 ＨＣＩ Ｍ — 卜 Ｌ￣ ｆ ＨＮ —★一ＨＣＨＮ　
－

时 问 ／　 ｄ
４－ Ｈ ＣＬ － Ｎ — ■一 Ｌ ＣＨＮ 十 　 ＨＣＨ Ｎ　

图 ２ 　

不 同 营 养 条 件 下

Ｐ． 　

图 ３ 不 同 营 养 条 件 下 Ｔ ｖｒｉ ｌｒ ． ｅｓ ｏｏ　 ｃ
产 漆 酶情 况　
Ｆｉ ｇ．３ Ｔ．ｖ ｒ ｉ ｏ ｏ 　 ｏｄｕ ｉ 　Ｌａ 　 　 ｅ ｓｃ ｌ ｒ ｐｒ ｃｎｇ ｃ
ｕ ｎｄｅ 　ｄｉ ｆ ｅ 　ｎｕ ｒ ｔｏｎ 　 ｒ ｆ ｅｒ ｎｔ ｔ ｉ ｉ ａｌ ｃｏ ｉ ｉ 　 ｎｄ ｔｏｎ

图 ４ 不 同 营 养 条 件 下 Ｆ．ｉ ＩＳ Ｓ １ Ｉ Ｕ 产　 ｇＯ 漆 酶 情 况　
Ｆｉ ｇ．４ 　 Ｆ．１ ｇ ｓ 　ｐｒ ｄｕ ｉ 　Ｌａ 　 ｉ ｎｏ ｕｓ ｏ ｃ ｎｇ ｃ ｕｎｄ ｒ ｄ ｆ ｅ ｅ 　 ｔ ｉ ｉ ａｌ ｅ 　 ｉ ｆ ｒ ｎｔ ｎｕ ｒ ｔｏｎ 　 ｃ ｄｉ ｉ 　 ｏｎ ｔｏｎ

ｃ ｒ ｓｓ ｏｉ ｍ 产 漆 酶 情 况　 ｈ ｙ ｏ ｒｕ ｐ
Ｆｉ ｇ．２ 　 Ｐ．ｃ ｙ ｏｓ ｒｕｍ　ｐｒ ｈｒ ｓ ｐｏ ｉ ｏｄｕ ｉ 　 ｃｎｇ
Ｌａ 　 ｃ ｕ ｎｄｅ 　 ｒ ｄｉ ｆ ｒ ｎｔ ｆｅ ｅ 　

ｎｕｔ ｉ ｉ ｎａｌｃ ｄｉ ｉ 　 ｒｔｏ 　 ｏｎ ｔｏｎ

从 测 得 酶 活结 果 可 以看 出 ， 碳 低 氮 培养 基　 高

…　

３ 白腐 菌的产漆酶量均很 高， 种 黄孢原毛平革菌　

１　　 ４ｌ ０

一 　

低培而高ｏｌｌ 囊Ｃ菌薹０Ｉ］ 大Ｉ对 萎　Ｉｌ 最／降　｜ＪＪ １低产为一　　 ２养低 矗ｌＬ· ．，酶 雾●－ Ｏ碳． ：匕■ 篓Ｎ漆 　Ｉ　　 ，基 量 　—Ｌ 高　这 ６＿＿ 　木 的 【｝　 这高 ３ ｝三Ｉ 即比 萎 『＿＿ 为的 相 　　ｒ １质 最 ＩＩ— 漆氮 影 匕 ｌ　 也Ｃ 对 ＝ＵＩ ４　种 Ｉ１］ 　层 响 ｜｜Ｊ Ｕ培 蓁 　－● １降 菌 一—． 酶孔产 Ｉ － 说／ 较 ■■＿ ３低 ＿ Ｌ ／Ｎ Ｌ １ ６养 量比 明基 Ｌ 　 ． ５ ， 随 了 　 而 Ｕ Ｉ ｎ 　
漆 酶 酶活 最 高 的 时问 均 在 培养 到第 ８天 左 右 ， 黄　 孢 原毛 平 革 菌产 漆 酶 量最 低 ， 变 色 栓 菌 和木 质　 而
时 间 ／　 ｄ 囝 黄 孢原 毛 平草 菌　 ● 变 色栓 菌　 口木 质 层 孔菌　

层孔 菌 相 比 ， 变色 栓 菌 产 漆酶 量 略 高 于 木质 层 孔　
菌 （ 图 ５． 见 ） 　
图 ５ 高 碳 低 氮培 养 条件 下 ３ 菌 种 产漆 酶 的 比较　 个
Ｆｉ ． ５ ｇ 　 Ｔｈ 　ｃ ｅ ｏｍ ｐ ｉ ｏ 　ｏｆ ａｒｓ ｎ 　Ｌａ 　ｕ ｃ ｎｄｅ 　 ｔ 　ｃ ｌｌ ａ ｅ ｒ ｈｅ ｕ　 ｖ ｔ　 ｔ ｃ ｏｎｄ ｔｏ 　 ｆ Ｈ ＣＬＮ　 ｉｉ ｎ ｏ 　

２ ２ 不 同培养 条件 对 ３ 菌产 Ｍｎ ． 种 Ｐ的影 响　

实验结 果表 明 ， 同营养 条 件下 ， ３ 试 验　 不 对 个
菌种产锰 过 氧化 物酶 也有一 定 的影 响 （ 见表 ２及 图 ６ ） ～９ ． 　

维普资讯 http://www.cqvip.com

１４ ３　

中

南

林

业

科

技

大

学

学

报　

第 ２ 卷　 ７

表 ２ 不同营养条件对 ３ 茵产 Ｍｎ 种 ｐ的影 响　
Ｔａｂ ｅ ２ Ｔｈｅ ｅ ｆ ｃ ｓｏｆｔ ｅ 　 ｎｐ ｗｉｈ ｄｉｆ ｒ ｎ 　 ｌ　　 　 ｆ ｅ ｔ　 　ｈｒ ｅ Ｍ 　 ｔ 　 ｆ ｅ ｅ ｔｎｕｔｉｉ ｒｔｏｎａ　 ｏｎｄ ｔｏ 　 ｌｃ ｉｉ ｎ

， 　

０　

３　

蝗　 苗　 苗　

蜒　 苗　 苗　 霉　
捌　

甥　

露　 赭　 霉　
舡ｉ 【 　

∞ 粥 鲫　 Ｏ 　 如 ∞ ∞ Ｏ　 Ｏ　Ｏ 　 Ｏ　∞ Ｏ 　Ｏ　 Ｏ
捌　

堪　
时 间 ／　 ｄ

耀　
时间 ／ 　 ｄ

时问／　 ｄ
—

—

◆ 一 Ｈ ＣＬ Ｎ

— 一Ｌ ■ ＣＮＨ

—★一 ＨＣＮＨ　

◆一ＨＣＬ Ｎ

－卜 Ｌ ． ＣＨＮ

— ▲一 ＨＣＨＮ　

＋

ＨＣＬ ＋ Ｎ

Ｌ ＣＨＮ ＋

ＨＣＨＮ　

图 ６ 不 同 营 养 条 件 下 Ｐ． ｈ ｙ ｏｐ ｒｕ 　 ｃ ｒ ｓｓ ｏ ｉｍ 产 Ｍｎ ｐ酶 情 况　
Ｆｉ 　６ ｇ 　 Ｐ．ｃ ｙ ｏ ｐｏ ｉｍ 　ｐｒ ｈｒ ｓ ｓ ｒｕ ｏｄｕ ｉ ｇ ｃｎ 　
Ｍ ｎｐ 　 ｕｎｄ ｒ ｅ　 ｄｉ ｆ ｅ 　 ｆ ｅｒ ｎｔ

图 ７ 不 同 营 养 条 件 下 Ｔ． ｅｓ ｏ ｒ ｖ ｒ ｃｌ 　 ｉ ｏ 产 咖 ｐ酶 情枷 枷 瑚 ｏ Ｍｎ 咖 况　 　 　 　 　 　 　
Ｆｉ　７ Ｔ．ｖ ｒ ｉｏ ｏ 　 ｒ ｄｕｃｎｇ Ｍ ｎｐ ｇ 　 ｅ ｓｃ ｌ ｒ ｐ ｏ ｉ 　 　
ｕ ｎｄｅ 　 ｄ ｆ ｅ ｅｎｔ ｃ ｌ ｉ ａ ｅ ｒ ｉｆｒ 　 ｕ ｔｖ ｔ　 ｃ ｄｉ ｉ 　 ｏｎ ｔｏｎ

图 ８ 不 同 营 养 条 件 下 Ｆ １ ｎｓｓ ．ｉ ｏｕ 产　 ｇ

Ｍｎ ｐ酶情 况　
Ｆｉ ｇ．８ 　 Ｆ．１ｇｎ ｓ ｓ ｉ ｏ ｕ 　ｐｒ ｄｕｃｎｇ ｏ ｉ 　Ｍ ｎｐ 　
ｕｎｄ ｒ ｄｉ ｆ ｒ ｎｔ ｃ ｔｖ ｅ ｅ　 ｆ ｅ ｅ 　 ｕｌ ｉ ａｔ 　 ｃ ｄｉ ｉ ｎ ｏｎ ｔｏ 　

Ｃ ｔｖ ｅ Ｃ ｄｉ ｉ 　 Ｕｌ ｉ ａｔ 　 Ｏｎ ｔｏｎ

由表 ２ 图 ６ 及 ～图 ９可 以看 出 ， 种 菌在 不 同的　 ３

营养 条件 下产锰 过 氧化物 酶 量有 一定 的不 同． 黄孢　 原 毛平革 菌在低 碳 高氮 的培 养条件 下 Ｍｎ Ｐ酶活 最　

高 ， ５ ０ ６Ｕ／ 而在 其它 ２种培养 基 中 ， Ｐ酶　 为 ５ ． 　 Ｌ， Ｍｎ

兰 　

活相对较低 ， 这也说明碳源和氮源的比例（ ／ 对　 Ｃ Ｎ） Ｍｎ Ｐ的产生有一定 的影响 ， ／ 越低有利 于锰过　 ＣＮ
氧化 物 酶的产生 ． 变色 栓 菌也 是在 低碳 高氮 的培养　 条件 下 Ｍｎ Ｐ酶活 最高 ， ７ １ ６Ｕ／ 其所 得 结果　 为 ８ ． 　 Ｌ，
同 张连 慧等 对变 色 栓 菌锰 过 氧 化 物 酶研 究 的结果　

薹 　 善 　

２ 　

４ 　

６ 　

８ 　

ｌ　 ０

ｌ　 ２

ｌ　 ４

ｌ　 ６

相似 ． 而木 质层孔 菌则 在 高碳低 氮 的培养 条件 下产　
Ｍｎ Ｐ酶 活最 高 ， ８ ０ ２Ｕ／　 且 ３ 菌 产 锰 过 氧　 为 ８ ．　 Ｉ， 种 化 物 酶 均 在 ８ｄ左 右达 到 最 高 ． 　 总体 来 说 ， 木质 层　 孔 菌 产 锰 过 氧 化 物 酶 相 对 比 其 它 ２ 种 菌 产　 Ｍｎ Ｐ量高． 　
２ ３ 还 原 糖 的 变 化　 ．

时闻／　 ｄ 囵 黄 孢原 毛平 革 菌　 一 变色 栓 菌　 口 木质 层 孔菌 　

图 ９ 高 碳 低 氮 培 养 条 件 下 ３ 茵 产 Ｍｎ 　 种 ｐ的 比较　
　ｃ ｓ 　 ｈｒ ｅ 　ｔ 　ｃ ｔ ｖ ｅ Ｆｇ ９ Ｔｈｅ ｏｍ ｐａｒｉｏｎ　ｏｆ ｔ ｅ 　Ｍ ｎｐ　ｕｎｄｅｒ ｈｅ ｕｌｉ ａｔ　 ｉ 　 ·

ｃ ｏｎｄ ｔｏｎ ｏｆ ＨＣＬＮ　 ｉｉ 　 　

实验 结果 表 明 ， 菌 培养 液 中还 原糖 浓 度随着 培养 时 间 的延长 而逐 渐下 降 ， １　 ３种 约 ６ｄ后 趋 于不 变 ， 也 与　 这 王传 魁 等　 研究 的 结果基 本 相符 （ 图 １ 所 示 ） 如 ０ ． 　

维普资讯 http://www.cqvip.com

第３ 期　

董 旭 杰 等 ： 白腐 菌 木 质 素 降 解 酶 的 比较　 ３种

１５ ３　

３ 结

论　

（ ） 过 对 Ｐ． ｈｙ ｏｐ ｒ ｍ、 ｖｒｉｏ ｒ和　 １ 通 ｃ ｒｓｓｏｉ ｕ Ｔ． ｅｓ ｌ ｃｏ

Ｆ １ ｎ ｓｓ３种菌 产漆 酶 的研究 ， 明 ３种菌均 能产 漆　 ．ｉ ｏｕ　 ｇ 表

酶． 目前 ， 研究 较多 的Ｔ． ｅｓ ｏｏ 漆酶量 最高 ， ｖ ｒｉ ｌ ｃ ｒ产 在本　
实验 的培养 条件 下 能达Ｎ １ ６ ５Ｕ／ Ｆ．ｉｇ ｓｓ ３ ．　 Ｌ， １ ｏｕ 产漆　 ｎ 酶量 次之 ， Ｐ．ｈｙ ｏ ｏｉｍ 产 漆 酶量最 低． 而 ｃｒ ｓｓ ｒｕ ｐ 　 （ ）在 产 锰 过 氧化 物 酶 方 面 ， 质 层 孔 菌产 锰 过　 ２ 木 氧化物 酶量 最高 ， 其最 高产 酶 量可 达到 ８ ０ ２Ｕ／ 而　 ８ ．　 Ｌ，
＋
４ 　 ６ 　 ８ 　 ｌ　 Ｏ ｌ　 ２ ｌ　 ４ ｌ　 ６

时问／　 ｄ 黄孢原 毛 平 革茁 ＋ 变色栓茁 —Ｉ一 木质 层 孔菌 　 ＿ ‘

变色栓 菌产 Ｍｎ Ｐ的量相 对 比黄孢 原 毛平革 菌 高些． 　
（ ）３种菌 对还 原糖 的消耗趋 势基 本相 似 ， ３ 随着培　

图 １ 高碳 低 氮 培 养 条 件 下还 原 糖 浓 度 的变 化　 Ｏ
Ｆｉ １０ Ｔｈ 　 ｈ ｇｅｏｆｇｌ ｏ ｅｃ ｃ ｎｔ ａ ｉ 　 ｇ． 　　 ｅ ｃ ａｎ 　 　 ｕｃ ｓ 　 ｏｎ ｅ ｒ ｔｏｎ ｄｕｒｎｇ ｔ 　 ｉ 　ｈｅ Ｈ ＣＬＮ　 ｏｎｄ ｔｏｎ． ｃ ｉｉ 　

养时 间的延 长还原糖浓 度逐渐 降低 ，　 ｄ后基本 耗尽． １　 ６ 　
参考 文献 ： 　
嚣、 ） 毯基 罄　 亚　 ｆ

［１ Ｓｉｖｓｎ４ 　 ２ 　 ｕ　 　　 　　 ４ 　 ｏ ｍｉａａｈ ｎ Ｋ ａ ｄ Ｒｅｄ 　 　 ］ ｒ ａ ａ　 Ｓ ０ｚ８ Ｔ６Ｍ ， ２ｏ０ 　 ｔｔａ　 　 ｎ 　 ｄ ｙ Ｃ Ａ，Ｄｅ ｎ ｔａｉｎ ｏ　ａｃｓ　ｎｔｅ ｗｈｔ　ｏ　 ａｉｉｍｙｅｅｐ ａ ｅｏ ］ ； ｎ ６ 　 Ｃ， ｏ ａ Ｂ　 ｎ ｍｏ ｓ ｔ 　 ｆｌｃａｅ ｉ ｈ　 ｉ ｒｔｂ ｓ ｏ ｃｔ ｈ ｎｒｃ 。 ｒ ｏ 　 ｅ ｄ 　 　。 　 ｃｒ ｓｓｏ ｉｍ　Ｋ　 —Ｆ ７７ Ａｐ １Ｅ ｖｒｎ Ｊ． ｉ ｏ ｉ１， ９ ５ ６ （２ ：２ ４ ２ ７ ｈｙ ｏｐ ｒｕ Ｂ Ｍ １ ６ ， ｐ． ｎ ｉ ［１ Ｍ ｃ ｂｏ． １ ９ ， １ １） ４ ７ —４ ７ ． ｏ ｒ 　 ｎ ｇ ｏ ｐ ｔ ｒ ｐ ｕ ｅ 　 ［ ］ Ｂ ｍｐ ｓＪＡ， ｅ　 ， ｒ ｈ　 ｅ　１Ｏｘｄ ｔ ｎｏ　 ｅｓｓｅｔｅ ｖ ｏ ｍｅ ｔｌ ｏｌｔｎ　ｙａｗｈｔ　ｏ　ｕ ｇ ｓＪ ．ｃｅ ｃ ，９ ５ ２ ８ １ ３ －　 ２　 ｕ ｕ　　 Ｔｉ Ｍ Ｗ ｉ ｔＤ，ｔａ． ｉａｉ 　ｆ ｒｉ ｎ　ｎ ｉ ｎ ｎａ　 ｌ ａ ｔｂ 　　 ｉ ｒｔｆｎ ｕ Ｅ］ Ｓｉｎｅ １ ８ ，２ ： ４ ４
１３ ． ４ ６　

［］ 李 慧 蓉 ． 腐 真 菌 生 物 学 和生 物技 术 ［ ］ 北 京 ： 学工 业 出版 社 ，０ ５ ３　 白 Ｍ ． 化 ２０． 　 ａ ｙ Ｅ ｆｃ　 　 ａｔ ｕｐａｄｌ ｉ ｎＴｒｍｅ ｓ ｒｉ ｌｒ ｒ ｏ　 ｔｂ ｌｍ， ｐｐＥ Ｅ ｖｒ ． ｃ ｂｏ． １９ ，９ ６ ：８ ５ ｏｋ 　 ｇ 　 ｅｖ ｃ ｃ ｓ Ｊ１ ｏ ｒ ［ ］ Ｂ ｉｎＰ ４　 ｒ 　 ，Ｒｏ ， ｆｅｔ ｆ ｒｆ ｐ ｌ　ｎ 　ｉｎｎｏ　 ａ ｔ 　ｅｓ ｏｏ　ａｂ ｎｍｅａｏｉ Ａ —ｌ ． ｎ ｉ ｎ Ｍ ｉ ｏ ｉ１，９ ３ ５ （ ） １ ５ －　
１ ３． ８６ 　

ｃ ｉ ｉａｉ 　ｆ ｔｒｃｎ　ｎ　ｅ ｚ［ ］ ｙｅｅｂ 　 ｃａｅｆｏ 　 ａ ｔ 　 ｒｉ ｌｒ Ｊ．Ａｐ １Ｅ ｖｒｎ Ｍｌｒｂｏ． １ ９ ， ２ ｏ ａ ａ ｅｖ ｃ ｐ． ｎ ｉ ． ｃｏ ｉ１ ，９ ６ ６　 ｏ ［ ］ Ｐ ｔｉ 　， ｌｎ ．Ｏｘｄ ｔ ｎｏ　ｎｈａｅ ｅａ ｄｂ ｎｏ ａｐ ｒｎ　ｙｌ ｃｓ　ｒｍ Ｔｒｍｅ ｓ ｅｓ ｏｏ ［］ ５　 ａｒ ｋＪ Ｃｏｌ ｓ
（ ２） ４ ６ １ ： ５ ３— ４ ６ ． ５ ７　 ａ ｎ ｅ 　ｎ ｓ ｌｃ ｅ 　 ｎ ｙｍｅａ ｔ ｉｉ ｓｄ ｉ ｇ ｇ ｏ ｈ ｏ 　 ｕ ｅ ａ ｄ ｍｉ ｓ ｄ ｃ ｔ ｒ ｓｏ 　 ｈ 　 ｉ 　 ｏ 　 ｅ ａ 　 ｕ ｇ ｓ Ｔｒ ｍｅ ｅ　 ｒ ｉｏ ｏ 　 　 ｃ ｉ ｔｅ 　 ｕｒｎ 　 ｒ ｗｔ 　 ｆｐ ｒ 　 ｎ 　 ｓ ｅ 　 ｕｌｕ ｅ 　 ｆｔ ｅ ｗｈ ｔ ｒ ｔｄ ｃ ｙ ｆ ｎ ｕ 　 ａ ｔ ｓ ｖ ｅ ｖｅ ｓｃ ｌ ｒ ［ ］ Ｆｒ ｉ ｇ Ｍ ． ６　 ｅ ｔ 　 Ｃｈａ ｇ ｓ ｉ　 ｅ ｅ ｔ ｄ ｅ ｚ

ａ ｄｐ ｔｎｉｌ ｉ ｏｒｌｕ ｇ ｓＴｒ ｈ ｄｒ ａｈ ｒｉ ｕ Ｊ．Ｃ ｎＪ Ｍｉｒｂｏ． １ ９ ，８ ４ ：１ — ３ ０ ｎ　 ｏｅ ｔ 　 ｏ ｔｏ ｆｎ ｕ　 ｉ ｏ ｅｍ 　 ａｚ ｎ ｍ［］ ａ ．． ｃｏ ｉ１，９ ２ ３ （） ３ ７ ４ ． ａｂｃ 　 ｃ ａ 　
ｎ ｚ Ｃ， ｉｌ 　 Ｍ ｒ ｉ ｅ 　 Ｔ ｅ 　 １ Ｌａ ｃ ｓ 　ｓ ｅ ｚ ｅ ｓ ｏ 　 ｅ ｒ ｔ ｓ ｅ ｙ ｇｉ： ｈ ｒ ｃ ｅ ｉａ ｔｏ ｃ ｔ ｌ ｔｃ ｐ ｏ ｅ ｔ ｅ ｎ 　 ａ ｔ ｐ ｔｏ 　ｎ ｃ ［］ Ｍ ｕ ｏ 　 Ｇｕ ｌ ｎ Ｆ， ａ ｔｎ ｚ Ａ　 ， ｔ ａ ． ｃ ａ ｅ ｉ ｏ ｎ ｙｍｅ 　 ｆＰｌ ｕ ｏ ｕ 　 ｒ ｎ ｉｃ ａ ａ ｔ ｒｚ — ｉ ｎ， ａ ａ ｙ ｉ　 ｒ ｐ ｒ ｉｓ，ａ ｄ ｐ ｒ ｉ ｉ ａ ｉ ｎ ｉ　 ７　

ａ ｔ ａｉｎｏ ｃｉ ｔ 　ｆｍｏｅｕａ　ｘ ｇｎａ ｄＭ　 ｏ ｉａｔ ｎ Ｊ． ｐ． ｎ ｉ ｎ Ｍ ｉ ｏ ｉ１， ９ ７６ ： １６ １ ４ ｖ ｏ ｌｃｌｒｏ ｙ ｅ　ｎ　 ｘｄ —ｉ ［］Ａｐ １Ｅ ｖｒ ． ｃ ｂｏ． １９ ，３ ２ ６ —２ ７ ． ｏ ｏ ｒ 　 ［３ 王 宜 磊 ． 耳 液体 培养 特 性 及 胞 外 酶 活性 研 究 ［］ 中 国食 用 菌 ，０ ０ １ （） ３ — ３ ． ８　 侧 Ｊ． ２ ０ ，９ ４ ：３ ５ 　 ［］ 谢 ９　 君， 任 路， 李 维， ． 等 白腐 菌 液 体 培 养 产 生 木 质 纤 维 素 降 解 酶 的 研究 ［］ 四川 大 学 学 报 （ ｊ． 自然科 学 版 ） ２ ０ ，７ 增 ） １ １ ６　 ，０ ０ ３ （ ： ６ —１ ６ 杨 ［ Ｏ　 王 传 魁 ， １］ 勇 ． 芝 、 射 菌 产 木 质 素 降 解 酶 的 比较 研 究 ［］ 纤 维 素 科 学 与技 术 ， ０３ １ （ ）２ —３ ． 云 脉 ｊ． ２ ０ ， １２ ：６ ０ 　

［ 文编校 ： 曼辉］ 本 胡